X射線輻照在候選放射抗性基因的作用



用轉座子進行全面的基因篩選是系統鑒定抗性基因的新方法。本研究旨在利用該技術鑒定食管鱗狀細胞癌中的候選放射抗性基因。轉座子是一種堿基序列,可以隨機轉換到基因組中的另一個位置。通過在轉座子中插入巨細胞病毒啟動子作為轉錄激活因子,新位置的下列基因變得過表達,位于轉座子插入位點的基因被下調。因此,可以獲得使用轉座子方法具有差異過表達或下調基因的各種轉座子標記的細胞。在轉座子標記的細胞照射后,可以選擇候選放射抗性基因以檢測轉座子在存活的細胞中的位置。

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2. MT-CO1下調細胞的放射抗性。 在7-Gy照射后1,3,5,79天測量細胞存活率。 在第5,79天,MT-CO1下調細胞的存活率顯著更高(P <0.001)。 誤差線表示平均值的標準偏差。 MT-CO1,細胞色素c氧化酶1; RRCs,抗輻射細胞。

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照射后的Caspase-3活性。 照射5-Gy后,將親本(TE4)細胞和RRCMT-CO1-下調細胞)與比色底物DEVD-pNA一起溫育24小時。 Caspase-3活性測量為405nm處的吸光度,并且發現在照射后親本細胞中的Caspase-3活性更高(* P <0.001)。 誤差線表示平均值的標準偏差。 MT-CO1,細胞色素c氧化酶1; RRCs,抗輻射細胞。

 

結果:共檢測到11個基因作為候選放射抗性基因。細胞色素c氧化酶1MT-CO1)是一種通過激活caspase級聯參與細胞凋亡的酶,是鑒定的候選基因之一。MT-CO1誘導的放射抗性的下調通過抑制放射抗性食管癌細胞中半胱天冬酶級聯的激活而發生。

 

文章來源:

Downregulation of cytochrome c oxidase 1 induced radioresistance in esophageal squamous cell carcinoma




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